鬼笔环肽及偶联物（Phalloidin and Phalloidin Conjugates）
◎ FORSTAINING ACTIN肌动蛋白染色探针 ◎
◎ 搜索关键词：
Phalloidin 鬼笔环肽；F-actin肌动蛋白（聚合）；G-actin 球形肌动蛋白（单体）；Actin Polymerization 肌动蛋白聚合；Cytochalasin 细胞松弛素；CAS NO.：17466-45-4；
◎ 背景介绍：
肌动蛋白（Actin）是一种分子量~42kDa的细胞骨架蛋白，几乎存在所有真核细胞中。也是一种最高度保守蛋白，藻类和植物之间序列差异不超过20%。肌动蛋白是细胞中两种纤维的单体亚基：微丝（Microfilaments），又称肌动蛋白丝（Actin filaments），细胞骨架三种主要成分之一；细肌丝（Thin filaments），肌肉细胞收缩丝的一部分。因此，肌动蛋白参与许多重要的细胞生理过程，包括肌肉收缩、细胞运动、细胞分化和胞质分裂、囊泡和细胞器运动、细胞信号，以及细胞连接和细胞形状的搭建和维持。
单体形式存在的称为球形肌动蛋白（Globular actin，G-actin），具有紧密的结合位点介导其与另外两个单体肌动蛋白进行头-尾相互作用，从而使得单体激动蛋白聚合形成纤维（Filamentous actin，F-actin）【见图1.肌动蛋白丝的组装和结构】。
图1. 肌动蛋白丝的组装和结构。（A）G-actin聚合形成F-actin。第一步生成二聚体和三聚体，然后通过逐步添加单体蛋白到两端来生长。（B）G-actin的结构。
鬼笔环肽（Phalloidin），又称鬼笔鹅膏素，是从毒蘑菇鬼笔鹅膏（Amanita phalloides）中分离到的一种七肽毒素，以极高的亲和力和特异性结合肌动蛋白丝F-actin（聚合形式的肌动蛋白），不会结合单体肌动蛋白（G-actin）。不像一些肌动蛋白抗体，同时识别单体和聚合形式的肌动蛋白。鬼笔环肽使得肌动蛋白聚合/解离的临界浓度降低至1μg/ml，可用作一种聚合增强剂。产生的复合物高度稳定（解离常数约为3×10–8M），从而抵抗去聚合和去组装活性。
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◎ 产品应用：
1）用来标记、鉴定和定量肌动蛋白丝（F-actin）；
2）体外稳定肌动蛋白丝（F-actin）；
3）体外观察固定或活细胞中肌动蛋白丝（F-actin）的定位、分布，以及观测单一的F-actin；
4）高分辨率下研究肌动蛋白网络；
◎ 产品特点：
1）应用范围广：甲醛固定和透化处理的组织切片、培养细胞，以及无细胞实验体系；无物种差异性；
2）亲和力高、稳定性强：解离常数Kd约3×10–8M；
3）特异性强：特异结合F-actin，不会结合G-actin，背景明显低于Actin抗体染色，几乎无特异性染色，且不受物种限制。
4）毒性小：鬼笔环肽及衍生物分子量小，对F-actin影响小。经标记后的F-actin仍维持许多未标记actin的功能特征包括与肌球蛋白的相互作用。
5）灵敏度高：nM浓度即可达到染色需求；
6）适合多重标记实验：提供多种鬼笔环肽荧光偶联物，选择范围广，能实现多重标记；
◎ 染色流程【图2】：
◎ 染色示例：
图3. Jasplakinolide (Jas)或Cytochalasin D (Cyto D)对HSC-T6细胞肌动蛋白骨架重组的生理效应。HSC-T6细胞分别经DMSO (vehicle control)，Jas (100 nM) or Cyto D (1 μM)处理1h，之后4%多聚甲醛固定15 min。之后phalloidin-FITC（MX4403）染色肌动蛋白丝，细胞核用DAPI（MX4207）复染。荧光显微镜下成像检测。
图4. HeLa细胞经iFluor™ 488 Phalloidin染色后荧光显微 镜检测图（FITC滤片设置-绿色）。 |
图5. HeLa细胞经iFluor™ 647 Phalloidin染色后荧光显微镜检 测图（Cy5滤片设置-红色）。 |
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产品编号 |
产品名称 | 规格 | Ex/Em | 价格（元） |
MX4401-1MG |
Phalloidin | 1mg | N/A | 3188 |
| MX4402-1MG | Amino Phalloidin | 1mg | N/A | 7480 |
MX4403-300T |
FITC Phalloidin | 300T | 492/518 | 788 |
| MX4404-1MG | FITC Phalloidin | 1mg | 492/518 | 5128 |
MX4405-300T |
TRITC Phalloidin | 300T | 546/575 | 788 |
| MX4406-1MG | TRITC Phalloidin | 1mg | 546/575 | 5128 |
MX4407-1MG |
5-TAMRA Phalloidin | 1mg | 542/568 | 5188 |
| MX4408-300T | iFluor™ 350 Phalloidin | 300T | 353/442 | 2088 |
MX4409-300T |
iFluor™ 405 Phalloidin | 300T | 400/421 | 2088 |
MX4410-300T |
iFluor™ 488 Phalloidin | 300T | 492/518 | 2088 |
MX4411-300T |
iFluor™ 555 Phalloidin | 300T | 556/574 | 2088 |
MX4412-300T |
iFluor™ 594 Phalloidin | 300T | 590/618 | 2088 |
| MX4413-300T | iFluor™ 647 Phalloidin | 300T | 650/665 | 2088 |
| MX4414-300T | iFluor™ 680 Phalloidin | 300T | 681/698 | 4388 |
| MX4415-300T | iFluor™ 790 Phalloidin | 300T | 787/808 | 4388 |
【注】：iFluor™系列的荧光光谱同Alexa Fluor™系列，荧光稳定性和荧光强度几乎与Alexa Fluor™一致，是传统荧光探针FITC, TRITC, 5-TAMRA等的升级品。
◎ 相关产品：【见我司整理的细胞松弛素Cytochalasin产品专题】。
| 货号 | 产品名称 | CAS NO. | 规格 | 价格（元） |
| MZ5801-1MG | Cytochalasin B 细胞松弛素B | 14930-96-2 | 1mg | 539 |
| MZ5801-5MG | Cytochalasin B 细胞松弛素B | 14930-96-2 | 5mg | 1478 |
| MZ5802-1MG | Cytochalasin D 细胞松弛素D | 22144-77-0 | 1mg | 1088 |
| MZ5802-5MG | Cytochalasin D 细胞松弛素D | 22144-77-0 | 5mg | 4158 |
| MZ5803-1MG | Cytochalasin A 细胞松弛素A | 14110-64-6 | 1mg | 698 |
| MZ5804-1MG | Cytochalasin C 细胞松弛素C | 22144-76-9 | 1mg | 1158 |
| MZ5805-1MG | Cytochalasin E 细胞松弛素E | 36011-19-5 | 1mg | 728 |
| MZ5806-1MG | Cytochalasin H 细胞松弛素H | 53760-19-3 | 1mg | 1528 |
| MZ5807-1MG | Cytochalasin J 细胞松弛素J | 53760-20-6 | 1mg | 1528 |
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归欧宝体育平台app下载 生物/MKBio懋康所有】