DirectPCR Lysis Reagent (Cell) 细胞直接PCR裂解液

¥2384.00

For use with cultured cells!

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描述

DirectPCR Lysis Reagent (Cell) 细胞直接PCR裂解液

【单瓶试剂,细胞裂解+PCR一步到位】

产品关键词:

Viagen Biotech; DirectPCR® 直接PCR;PCR genotyping 基因分型;Proteinase K 蛋白酶K;302-C (301-C);

 

产品介绍:

Viagen DirectPCR® DNA Extraction System(DirectPCR® DNA提取系统)是一种单管系统,用于从小鼠尾巴,耳片,卵黄囊和培养细胞内快递制备DNA。Viagen Biotech, Inc科学家开发的专利组分(正在申请专利)允许用DirectPCR® DNA Extraction System获得的DNA提取物与基因分型用的基因组PCR兼容。生物样本的粗提物与许多分子生物学级的试剂比如PCR都难以兼容,部分原因在于粗提物内含有抑制剂。DirectPCR®不仅介导生物样品的快速裂解,而且含有抑制剂,能够有效抑制PCR扩增用粗提裂解物中存在的抑制效应,同时最大程度保持释放出来的基因组DNA的完整性。专利申请中的DirectPCR®操作起来,完全消除任何溶液转移或开管步骤,根本上节省了大量时间和精力。

 

产品特点:

1)省时:更少的动手时间;尾巴裂解液粗提物即可用于PCR;

2)省钱:仅需成本的反应流程;

3)安全:无有机试剂;

4)环保:更少消耗(有机试剂,管子,枪头等等)

5)可靠有效:100%成功率保证高产量

 

简单流程:

1)用DirectPCR®裂解细胞;

2)85℃孵育45min;

3)取1μl裂解液进行PCR基因型研究。

 

详细流程:

1)10cm细胞培养板细胞,使用添加新鲜制备的0.2-0.4mg/ml蛋白酶K的200-300μl DirectPCR®Lysis Reagent (Cell) 细胞裂解液重悬细胞。蛋白酶K在DirectPCR®中稳定保存~24h。如果处理少量细胞,会很难称量蛋白酶K粉末,可直接使用Viagen提供的基因组PCR级的蛋白酶K溶液(Cat#501-PK),使用浓度为0.5-1.0mg/ml(每1ml DirectPCR®中加入25-50μl蛋白酶K溶液)。【注意】:若使用小量细胞,可用去离子水稀释DirectPCR®高达10倍,然后使用合适更多体积的裂解液用于PCR。见表1,DirectPCR®Lysis Reagent (Cell)起始使用条件。

2)置于旋转杂交炉中,55℃转动管子处理5-6h或直到看不见组织团。若有必要,能过夜裂解样本,不会影响效率。完全裂解至关重要。要想获得更具有重复性的结果,中途摇动一下瓶子以更换管子的位置一次,最好在处理2-3h之后。

3)水浴锅内85℃孵育粗提液45min。【可选】于步骤4)前离心10s沉淀毛发。粗提液可置于-20℃保存1年(或4℃保存1周),不会降低效率。

4)每50μl PCR反应体系加入0.5-1.0μl裂解液。推荐PCR用Qiage Hotstar Taq DNA polymerase或Sigma JumpStart Taq DNA polymerase。

 

表1,DirectPCR®Lysis Reagent (Cell) 起始使用条件。

plate (# cells)   Tube size (ml)    DirectPCR-Cell (μl)    Dilution (fold)      Lysates (μl)/50μl PCR rxn 
96 well* 0.75 50-70 1 1-1.5
96 well** 0.75 60-80 2 2-3
24 well* 0.75 70-100 1 1-1.5
6 well* 0.75 100-140 1 1-1.5
10cm* 1.5ml 200-300 1 1-1.5

* Lysis using rotation hybridization oven. 

** Lysis using rocking plate. Wash cells in 96-well plate twice with phosphate buffered saline and add 60 µl DirectPCR Reagent (Cell), which has been 2-fold diluted.  Incubate at 55°C overnight. Place the 96-well plate in the wet chamber and float the chamber on the 85°C water bath for 1.5 hrs.  Pipette up and down several times. Take 1 µl of lysates for PCR.

 

订购信息:Viagen Biotech原装正品,现货供应,产品销售到全球上千家公司和欧宝体彩下载 单位,包括Merck,Fisher,Gentaur,Cosmo, Applied stemcell, Genetech,pFizer等等。欢迎来电咨询,021-54736159,QQ:2716000500。

品牌 名称 货号              规格             
Viagen Biotech        DirectPCR Lysis Reagent (Cell) 301-C 50ml
Viagen Biotech DirectPCR Lysis Reagent (Cell)) 302-C 100ml
Viagen Biotech Genomic PCR Grade Proteinase K Solution         501-PK 5ml

下载:DirectPCR Lysis Reagent (Cell) Protocol Manual

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归欧宝体育平台app下载 生物/MKBio懋康所有】

 

其他信息

品牌:

Viagen Biotech

CAS:

N/A

规格:

100ml

货期:

现货1-2天 期货3周