合作品牌/COOPERATE BRANDS

抗体具有紧凑而稳定的二级结构，使其成为相对稳定的蛋白质。 标签和规格数据表中列出了特定的存储建议。 一般来说，抗体可以储存在 -20°C 或 -70°C。 避免反复 冻融。 如果合适，在冷冻前将未稀释的抗体分装成更小体积（不少于 10μl）。 将稀释的抗体储存在 2-4°C（不要冷冻）并在 1 个月内使用。

请提供尽可能多的有关实验的详细信息以及生成的数据示例。 实验详细信息和数据以及问题描述应通过电子邮件发送至 techserv-usa@enzolifesciences.com。 请务必提供以下信息：CAT号、批号、采购订单号、使用的应用程序、遵循的协议、使用的样本类型和物种、样本处理、使用的阳性/阴性对照、已进行的故障排除工作、确认这是否是第一个您使用问题产品，并确认生成数据的时间。

SEEBRIGHT®荧光标记DUTP作为1 mM溶液提供。我们建议通过向23.3µL无核酸酶水中添加10µL标记的dUTP来制备0.3 mM的工作浓度。使用后，将稀释的dUTP储存在-20˚C下。对于除绿色dUTP外的所有荧光dUTP，dTTP和dUTP的比率为2:1（3.3μl dTTP和1.7μl dUTP）。因此，反应管中标记dUTP的最终浓度为10.2µM。对于绿色500 dUTP，dTTP和dUTP标记的比率为1:1（2.5μl dTTP和2.5μl dUTP）。因此，反应管中标记dUTP的最终浓度为15µM。最后，对于bio-16-dUTP或地高辛dUTP，dTTP和dUTP标记的比率为1:2（1.7μl dTTP和3.3μl dUTP）。因此，反应管中标记dUTP的最终浓度为19.8µM。

选择合适的阴性对照是研究者的选择。对于核酸样本，阴性对照设计可能需要设计和合成一个不同序列的探针，该探针没有“特征序列”或特定的检测序列。由于该试剂盒是一种比色检测系统，可检测标记有生物素的样品，理想的阴性对照应为未标记样品。

当RNA是ISH的目标时，考虑到RNA酶的普遍存在，RNA在样品中的保存非常重要，因为RNA酶可以快速降解样品。在样品制备和染色的所有阶段，应使用手套、无菌设备和无RNase的实验室用具和试剂。强烈建议使用RNase去污溶液清洁工作表面和切片机等仪器。

在向细胞中添加胰蛋白酶之前，完全去除细胞生长培养基是很重要的。通常，结块是由于用胰蛋白酶处理细胞太久而引起的。你的胰蛋白酶溶液需要含有EDTA。这将有助于胰蛋白酶化。我建议添加2至3mL胰蛋白酶EDTA溶液，之前在37°C下加热，非常精细地加入细胞，并在37°C下培养1至3分钟。为避免结块，在等待细胞分离或迫使细胞分散时，不要搅动或撞击烧瓶。在培养过程中，每分钟检查一次细胞，如果一分钟后细胞分离，可以通过轻轻地重新悬浮在10mL细胞生长培养基中继续进行下一步。在将细胞生长培养基添加到已胰蛋白酶化的细胞中后，可以设想在计数并将细胞1:4或更大比例分割成100毫米组织培养板之前，使用1毫升塑料尖进一步缓慢上下移液。